如何才能用好安捷倫色譜柱這件事確實值得好好學習

瀏覽次數：1172發布日期：2022-07-21

　　安捷倫色譜柱的正確使用和維護非常重要，稍有不慎就會降低色譜柱效率，縮短使用壽命，甚至損壞色譜柱。在色譜操作過程中，為了維護色譜柱，需要注意以下幾個問題。

　　1、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機械振動。溫度的突然變化或色譜柱從高處墜落都會影響柱內的填充情況；柱壓的突然升高或降低也會對柱內的填料產生沖擊，因此應緩慢調節流速，進樣時閥門轉動不宜過慢。

　　2、溶劑的組成應逐漸改變，尤其是反相色譜。不應直接由有機溶劑改為全水，反之亦然。

　　3、一般來說，色譜柱不能反沖。只有在生產廠家表明可以反沖的情況下，才能通過反沖去除殘留在柱頭的雜質。否則，反沖會迅速降低柱效。

　　4、選擇使用合適的流動相（尤其是pH），避免破壞固定相。有時可以在進樣器前面連接一個預柱。分析柱為鍵合硅膠時，前置柱為硅膠，可以使流動相在進入分析柱前被硅膠“飽和”，避免硅膠基質在分析柱中溶解。

安捷倫色譜柱

　　5、避免將基質復雜的樣品，尤其是生物樣品直接注入色譜柱。需要對樣品進行預處理或在進樣器和色譜柱之間連接保護柱。保護柱通常是填充有類似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。

　　6、經常用強溶劑清洗色譜柱，以除去柱內殘留的雜質。清洗時，對流路徑系統中流動相的更換應逐漸用可混溶的溶劑轉移，每個流動相的體積應為柱體積的20倍左右，即常規分析需要50~75ml。

　　7、色譜柱存放時，用乙腈或甲醇填充色譜柱，并擰緊色譜柱接頭，防止溶劑揮發干燥。不要將緩沖溶液留在柱子中過夜或更長時間。

　　8、色譜柱在使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結過濾器堵塞。此時應更換或拆下過濾器進行清洗；另一種可能是大分子進入柱子，污染柱頭；如果柱效降低或色譜峰變形，柱頭可能會塌陷，死體積可能會增加。

　　一般安捷倫色譜柱在正確使用的情況下，使用壽命可達2年以上。硅膠基填料只能在ph2~9范圍內使用。柱子使用一段時間后，一些吸附力強的物質可能會殘留在柱子頂部，尤其是一些有色物質更容易被看到吸附在柱子頂部的填料上。新色譜柱使用一段時間后，柱頂填料可能會塌陷，降低柱效。這時也可以加入填料來恢復柱效。

　　安捷倫色譜柱每次工作后，最好用洗脫能力強的洗脫液清洗。例如，ODS柱應用甲醇清洗至基線平衡。當使用鹽緩沖溶液作為流動相時，應在使用后用無鹽流動相清洗。含有鹵素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道，不應長時間接觸。如果安裝在HPLC儀器上的色譜柱不經常使用，應每4-5天打開并清洗15分鐘。